میترا خادمی؛ فرهاد نظریان فیروزآبادی؛ احمد اسماعیلی
چکیده
چکیدهتولید ریشه مویین به کمک Agrobacterium rhizogenesیکی از مهمترین روشهای بیوتکنولوژی برای تولید متابولیتهای ثانویه و پروتئینهای نوترکیب است. یکی از چالشهای مهم ریشه مویین، تولید کم زیستتوده است. به ...
بیشتر
چکیدهتولید ریشه مویین به کمک Agrobacterium rhizogenesیکی از مهمترین روشهای بیوتکنولوژی برای تولید متابولیتهای ثانویه و پروتئینهای نوترکیب است. یکی از چالشهای مهم ریشه مویین، تولید کم زیستتوده است. به منظوربهینهسازی محیط کشت ریشه مویین در گیاه توتون، تأثیر فاکتور نیتروژن با نسبتهای مختلف نیترات به آمونیوم (NO3/NH4) در سه غلظت 19/20، 1/5/1/5و 1/5/30میلیمولار، میزان پتاسیم دی هیدروژن فسفات (KH2PO4) بهعنوان منبع تأمینکننده فسفر(3، 6 و 12 میلیمولار) در محیط MS بهصورت کشت جامد و مایع در قالب یک طرح کاملاً تصادفی در آزمایشگاه بیوتکنولوژی دانشکده کشاورزی دانشگاه لرستان در سال 1395 انجام شد. تراریخت بودن ریشهها به کمک واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) با آغازگرهای اختصاصی ژن rolC تأیید شد. تجزیه واریانس دادههای میزان وزن خشک و تر ریشههای مویین نشان داد که نیتروژن، فسفر و نوع محیط کشت روی میزان تولید زیستتوده اثرات معنیدار (05/0P<) دارند. بیشترین زیستتوده، مربوط به محیط کشت MS حاوی میزان بالای از نسبت نیترات به آمونیوم و12 میلیمولار پتاسیم دی هیدروژن فسفات با حداکثر وزن تر و خشک بعد از یک ماه بهترتیب با 66/11 و 47/0 گرم بود. کمترین وزن خشک و وزن تر در محیطی با میزان کمتری (1/5/1/5 میلیمولار) از نسبت نیترات به آمونیوم و 6میلیمولار پتاسیم دی هیدروژن فسفات مشاهده شد. همچنین در محیط کشت MS مایع همراه با میزان بالای نسبت نیترات به آمونیوم بیشترین میزان تولید زیستتوده حاصل شد. با توجه به اهمیت تولید بیشتر زیستتوده، از روش القاء ریشه مویین این مطالعه میتوان برای افزایش زیستتوده برای تولید ترکیبات دارویی و صنعتی استفاده کرد.